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La variación de las técnicas de cultivo de linfocitos y de bandeo cromosómico, según las especies y condiciones de laboratorio, hace que sea indispensable estandarizarlas para la especie objeto de estudio, con el fin de ...

La literatura afirma que la aloína cuenta con propiedades bioinsecticidas y es una gran alternativa para la agricultura, pero también es importante evaluar su efecto genotóxico ante los linfocitos humanos, ya que los ...

Estandarización de técnicas de tinción aplicadas a cromosomas obtenidos de linfocitos humanos cultivados “in vitro” en medio rpmi -1640
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Jaimes Jaimes, Nayeli Alejandra | 2016

La variación de las técnicas de cultivo de linfocitos y de bandeo cromosómico, según las especies y condiciones de laboratorio, hace que sea indispensable estandarizarlas para la especie objeto de estudio, con el fin de obtener mejores resultado. Se realizaron una serie de diseños experimentales en donde se evaluaron diferentes variables, para el estudio de estabilidad del medio de cultivo tales como: temperatura, tiempo de almacenamiento e índice mitótico; para la técnica de ICH concentración de BrdU y tiempos de aplicación, concentración de Hoechst y tiempos de acción y para banda R tiempos de exposición a luz blanca, tiempos de acción de la SSC 2X y tiempos para tinción. La valoración de cada tratamiento se realizó mediante la evaluación de la morfología de las metafases y presencia de patrón de bandeo. Se estableció que los mejores resultados para la estabilidad del medio de cultivo se obtuvieron para un periodo de tres meses independientemente de la temperatura de almacenamiento; para intercambio de cromátides hermanas (ICH) una concentración de BrdU de 4μg/por ml de cultivo aplicada a las 46 horas de incubación y una exposición a Hoechst de 30 minutos por lamina a una concentración de 2μg/por ml de cultivo para la tinción, para banda R una concentración de BrdU de 1mg/ml aplicada 7 horas antes de empezar el proceso de cosecha y para la tinción un tiempo de exposición a luz blanca de 30 minutos cubriendo cada lamina con 2X SSC, posteriormente se colorea con Giemsa durante dos minutos. Obteniéndose estos buenos resultados con base a una revisión bibliográfica, haciendo pequeñas modificaciones en los protocolos encontrados

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Evaluación genotóxica en linfocitos humanos de la aloína componente principal de un bioinsecticida en linfocitos humanos
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Arévalo Ochoa, Liseth Beatriz | 2023

La literatura afirma que la aloína cuenta con propiedades bioinsecticidas y es una gran alternativa para la agricultura, pero también es importante evaluar su efecto genotóxico ante los linfocitos humanos, ya que los trabajadores estarán expuestos a esto. Para esto, se llevó a cabo la extracción de la aloína de las hojas de Aloe Vera por medio de la técnica de licuefacción, se le determinaron características fisicoquímicas, se prepararon tratamientos con diferentes concentraciones (1,0%; 1,5% y 2,0%) y para el control positivo se utilizó hidrogeno de peróxido y para el control negativo PBS. Por otro lado se obtuvieron linfocitos humanos de una muestra de sangre propia, extraída en un laboratorio externo a la universidad francisco de Paula Santander. Los linfocitos humanos y los tratamientos se sometieron a electroforesis alcalina en gel de células (SCGE) o ensayo cometa, las muestras fueron impregnadas en agarosa de bajo punto de fusión, se realizó una técnica de sándwich para protección y fijación de las células. Posteriormente se dejaron sumergidas en solución lisis por 3 horas, seguidamente se sacaron y se desnaturalizaron en buffer por 20min, finalmente se llevaron a electroforesis alcalina. Las muestras se tiñeron con gel red, los linfocitos se observaron en el objetivo de 40x, las imágenes fueron capturadas por optika pro view y evaluadas en el software comet score donde la longitud de cola y el porciento de ADN en la cola fueron el parámetro que se tuvo en cuenta para la medición. Mostrando un mayor daño en los tratamientos con concentraciones de 1,5%(C2) y 2,0%(C3). Podemos concluir que la concentración de extracto de aloína es directamente proporcional al daño de los linfocitos humanos.

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